PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是指在DNA聚合酶催化下，以母鏈DNA為模板，以特定引物為延伸起點，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復(fù)制出與母鏈模板DNA互補(bǔ)的子鏈DNA的過程。

　　PCR試劑盒是一項DNA體外合成放大技術(shù)，能快速特異地在體外擴(kuò)增一定長度的DNA段。可用于基因分離克隆，序列分析，基因表達(dá)調(diào)控，基因多態(tài)性研究等許多方面，且價格合適。

　　PCR試劑盒的使用注意事項有哪些：

　　注意事項一：保存

　　未拆封的試劑盒，請于-20℃保存；拆封之后，應(yīng)在4℃保存。

　　在試劑消耗量較少的實驗室，可以考慮將按照組分單獨分裝，后保存在-20℃。

　　注意事項二：配置

　　試劑盒內(nèi)所含各組份都是混合物，在靜置情況下會發(fā)生分層現(xiàn)象，因此，現(xiàn)配現(xiàn)用，震蕩混勻，避免反復(fù)凍融，避免預(yù)混。其中，反復(fù)凍融將大幅縮短使用壽命。

　　在擴(kuò)增體系的選擇時，盡量選擇標(biāo)準(zhǔn)體系，再根據(jù)檢材情況加入模板，之后切勿忘記以PCR用水補(bǔ)足擴(kuò)增體系。

　　注意事項三：切勿預(yù)混

　　因試劑盒中酶的活性較高，將各組份按照比例混合之后，即使沒有達(dá)到它的較適溫度，但也可能發(fā)生與引物結(jié)合，導(dǎo)致實驗結(jié)果出現(xiàn)丟位點或者雜合子純化等情況。

　　注意事項四：陰陽性參照

　　實驗結(jié)果會受提取、擴(kuò)增和電泳等多個環(huán)節(jié)的影響，因此，每次擴(kuò)增實驗都應(yīng)該添加一組陰陽性參照。這樣，當(dāng)結(jié)果異常的時，我們就可以結(jié)合陰陽性參照的表現(xiàn)，排查問題出在哪個環(huán)節(jié)。

　　注意事項五：陽性參照是否通用

　　雖然多數(shù)試劑盒的陽性參照都是007，但是案件試劑盒和建庫試劑盒的陽性參照濃度不同，通常來說案件試劑盒的濃度更低。

　　注意事項六：擴(kuò)增程序

　　擴(kuò)增程序是能夠?qū)⒃噭┖懈笮馨l(fā)揮出來而設(shè)計，切勿隨意更改；再者，不同試劑盒所含酶的升溫模式也有不同，因此，在設(shè)置擴(kuò)增程序時，要選擇對應(yīng)的升溫模式。